sec蛋白纯化，即尺寸排阻色谱（Size Exclusion Chromatography, SEC），是一种基于分子尺寸差异的分离技术。它主要用于蛋白质、核酸及其他生物大分子的分离和纯化。sec蛋白纯化的核心原理是利用多孔基质填充柱，通过分子在凝胶颗粒之间的流动路径不同实现分离。大分子因无法进入小孔而快速通过，小分子则会进入孔隙中滞留较长时间，从而根据分子大小依次流出。这项技术在生物化学、分子生物学研究中具有广泛应用，尤其在蛋白质的结构分析、复合物研究、聚合状态分析等领域中。sec蛋白纯化不仅用于实验室研究，还在生物制药工业中有所贡献。它能够帮助研究人员快速有效地分离天然蛋白质、重组蛋白质及其复合物，以确保下游实验的准确性和成功率。此外，sec蛋白纯化过程通常不会改变蛋白质的天然构象和生物活性，这对于需要保持功能活性的蛋白质研究尤为关键。在药物开发过程中，该技术用于检测药物制剂中蛋白质的聚合状态，以保证药物的安全性和有效性。由于sec蛋白纯化能够在温和条件下进行，无需化学修饰和高盐浓度，因此对样品的损伤较小，是一种非破坏性技术。其应用不仅限于蛋白质，还适用于多糖、核酸、纳米颗粒等其他生物大分子的分离和分析。

一、sec蛋白纯化的优缺点

1.优点

（1）可以在温和的条件下进行，保持蛋白质的天然构象和活性。

（2）不需要化学修饰或标记，适用于生物活性物质的分离。

（3）能够同时提供有关分子量和纯度的信息。

2.缺点

（1）分离能力有限，主要适用于分子量差异较大的样品。

（2）分辨率相对较低，难以分离结构和分子量非常相似的分子。

（3）需要较长的分离时间，样品处理量有限。

二、实验注意事项

在进行sec蛋白纯化实验时，需要注意以下几点以确保实验的成功：

1.样品体积与浓度

样品体积过大会影响分辨率，因此需根据色谱柱的容量选择合适的样品体积。样品浓度过高可能导致柱子过载，应保持在推荐范围内。

2.缓冲液的选择

缓冲液的pH和离子强度会影响蛋白质的溶解性和稳定性，应根据蛋白质的性质选择合适的缓冲液。

3.柱子的维护

定期清洗和维护色谱柱以延长其使用寿命，并确保分离效果的一致性。

百泰派克生物科技在sec蛋白纯化方面具备丰富的经验与专业技术，我们的团队能够为客户提供定制化的蛋白质纯度分析方案，确保高质量的分离效果。我们致力于为客户提供最优质的服务，如有需要，欢迎与我们合作，无论是学术研究还是工业应用，我们都能为您提供全面的支持和解决方案。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

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